Samedi 10 Novembre 2007
CEA
Des nanoparticules pour l'imagerie de molécules uniques sur cellules.
Anal Chem (2007), 79, 7708-7718.
CEA
Des nanoparticules réfléchissant la lumière permettent de marquer des protéines et d'imager leur interaction avec un ligand à la surface d'une cellule en temps réel et à l'échelle de la molécule unique.
De nombreuses interactions protéine-protéine se produisent in vivo en deçà de leur constante de dissociation. Leur analyse nécessiterait idéalement leur observation à faible concentration, à l'échelle de la molécule unique, sur cellule vivante. Les sondes fluorescentes utilisées pour le marquage des protéines présentent l'inconvénient de perdre progressivement leur fluorescence et de s'éteindre par intermittence. Ces problèmes peuvent être résolus en utilisant des nanoparticules d'argent réfléchissantes pour imager les interactions protéine-protéine par microscopie optique en temps réel. Une nanoparticule couplée à une protéine apparaît floue en solution en raison des mouvements browniens et devient nette et change de couleur lorsqu'elle s'immobilise sur un récepteur à la surface d'une cellule. Les mesures des cinétiques d'interaction de la protéine marquée avec son récepteur permettent de calculer la constante de dissociation de cette réaction. Une équipe américaine a réussi à marquer un anticorps avec ces nanoparticules et à mesurer l'interaction de cet anticorps avec un récepteur artificiel fabriqué par une équipe du SIMOPRO. Ce récepteur est dérivé de la protéine A et de la toxine diphtérique. Il est facilement implantable à la surface d'une cellule, permettant un contrôle de sa densité.
Huang T, Nallathamby PD, Gillet D, Xu XH. (2007). Design and Synthesis of Single-Nanoparticle Optical Biosensors for Imaging and Characterization of Single Receptor Molecules on Single Living Cells. Anal Chem. 79:7708-7718.