Equipe Cristallogenèse
Enrico STURA
CEA Saclay/Bât. 152
enrico.stura@cea.fr
CEA Saclay/Bât. 152
enrico.stura@cea.fr
iBiTec-S / SIMOPRO / LTMB
Moyens humains
Enrico STURA, Chercheur
Laura VERA, Technicienne Supérieure
Thèmes de recherche
- Cristallogenèse
La cristallogenèse est le thème principal de la recherche effectuée. Le but est de développer de nouvelles approches pour la cristallisation des protéines et d'améliorer constamment les techniques courantes.
Les nouveaux développements incluent l'utilisation des anticorps et l'ingénierie de protéines bactériennes qui lient les immunoglobulines pour favoriser la cristallisation des complexes antigène-anticorps, ainsi que, la construction de systèmes protéiques d'échafaudage en employant des protéines de fusion et des étiquettes peptidiques afin d'éviter de produire de nouveaux anticorps contre chaque nouvelle cible protéique.
L'amélioration des méthodes courantes inclue la mise au point de techniques de criblage pour une recherche plus efficace des conditions de cristallisation quand on ne dispose que de faibles quantités de protéine, et une utilisation plus ciblée des additifs qui peuvent améliorer la taille et la qualité des cristaux obtenus. Ceci inclut les additifs qui contrôlent l'oxydation ou la réduction des cystéines libres, et ceux qui modifient les caractéristiques de nucléation et de croissance cristalline. L'expertise en cristallogenèse est mise à la disposition des collaborateurs qui ont des besoins structuraux afin d'assurer la bonne réussite des projets en cours.
- Ingénierie des protéines et Immunologie
Fragment Fc des IgG
Dans le domaine des anticorps nous partageons avec le Dr. Sylvie Jorieux de l'Unité de Recherche du LFB un intérêt particulier pour la partie Fc des immunoglobulines G humaines et pour son mode de fixation sur ses récepteurs; ce fragment est la cible d'une réponse pathologique de la part du système immunitaire, notamment les facteurs rhumatoïdes.
Le fragment Fc est utilisé comme partenaire de fusion pour l'expression des glycoprotéines. Nous avons effectué des essais pour obtenir des cristaux de glycoprotéines fusionnées à des Fc complexés au facteur rhumatoïde.
Antigènes et Epitopes des Anticorps
Le deuxième domaine de spécialisation concerne les interactions protéine-protéine, et plus spécifiquement les interactions entre anticorps et antigènes, l'antigène pouvant être un marqueur du cancer, un stéroïde, un peptide ou une protéine dérivée de microbe pathogène ou de virus. Cette thématique est partagée avec l'Unité Mixte BioMérieux-CEA qui est sous la responsabilité du Dr. Frédéric Ducancel.
Toxicologie nucléaire environnementale
Dans le cadre d'une collaboration avec Eric Quemeneur, nous avons résolu la structure cristalline de deux anticorps ayant comme hapten l'uranyle phenanthroline.
Toxines
Dans le cadre d'une collaboration avec Denis Servent, nous avons résolu la structure cristalline de la toxine muscarinique MT7 utilisée pour construire le modèle sur le récepteur hM1.
l'équipe est aussi intéressée par le toxines bactériennes responsables de modifications des petites protéine G comme l'Exoenzyme C3 de Clostridium botulinum responsable de l'ADP-ribosylation de RhoA et des grande toxines clostridiales qui ciblent la même protéine humaine.
La cristallogenèse est le thème principal de la recherche effectuée. Le but est de développer de nouvelles approches pour la cristallisation des protéines et d'améliorer constamment les techniques courantes.
©CEA/E. Stura
Les nouveaux développements incluent l'utilisation des anticorps et l'ingénierie de protéines bactériennes qui lient les immunoglobulines pour favoriser la cristallisation des complexes antigène-anticorps, ainsi que, la construction de systèmes protéiques d'échafaudage en employant des protéines de fusion et des étiquettes peptidiques afin d'éviter de produire de nouveaux anticorps contre chaque nouvelle cible protéique.
©CEA/E. Stura
Les complexes entre protéines, entre protéines et acides nucléiques ou entre protéines et peptides sont biologiquement plus intéressants que la protéine seule. Les complexes peuvent présenter des difficultés additionnelles pour la cristallisation, mais dans le cas des macromolécules difficiles à cristalliser seules ils apportent aussi de nouvelles opportunités sur tout quand le système devient combinatoire avec plusieurs partenaires. Quand deux anticorps ont des épitopes distincts, ils peuvent être utilisés dans un complexe sandwich.©CEA/E. Stura
L'amélioration des méthodes courantes inclue la mise au point de techniques de criblage pour une recherche plus efficace des conditions de cristallisation quand on ne dispose que de faibles quantités de protéine, et une utilisation plus ciblée des additifs qui peuvent améliorer la taille et la qualité des cristaux obtenus. Ceci inclut les additifs qui contrôlent l'oxydation ou la réduction des cystéines libres, et ceux qui modifient les caractéristiques de nucléation et de croissance cristalline. L'expertise en cristallogenèse est mise à la disposition des collaborateurs qui ont des besoins structuraux afin d'assurer la bonne réussite des projets en cours.
- Ingénierie des protéines et Immunologie
Fragment Fc des IgG
Dans le domaine des anticorps nous partageons avec le Dr. Sylvie Jorieux de l'Unité de Recherche du LFB un intérêt particulier pour la partie Fc des immunoglobulines G humaines et pour son mode de fixation sur ses récepteurs; ce fragment est la cible d'une réponse pathologique de la part du système immunitaire, notamment les facteurs rhumatoïdes.
©CEA/E. Stura
Le fragment Fc est utilisé comme partenaire de fusion pour l'expression des glycoprotéines. Nous avons effectué des essais pour obtenir des cristaux de glycoprotéines fusionnées à des Fc complexés au facteur rhumatoïde.
Antigènes et Epitopes des Anticorps
Le deuxième domaine de spécialisation concerne les interactions protéine-protéine, et plus spécifiquement les interactions entre anticorps et antigènes, l'antigène pouvant être un marqueur du cancer, un stéroïde, un peptide ou une protéine dérivée de microbe pathogène ou de virus. Cette thématique est partagée avec l'Unité Mixte BioMérieux-CEA qui est sous la responsabilité du Dr. Frédéric Ducancel.
Toxicologie nucléaire environnementale
Dans le cadre d'une collaboration avec Eric Quemeneur, nous avons résolu la structure cristalline de deux anticorps ayant comme hapten l'uranyle phenanthroline.
Toxines
Dans le cadre d'une collaboration avec Denis Servent, nous avons résolu la structure cristalline de la toxine muscarinique MT7 utilisée pour construire le modèle sur le récepteur hM1.
l'équipe est aussi intéressée par le toxines bactériennes responsables de modifications des petites protéine G comme l'Exoenzyme C3 de Clostridium botulinum responsable de l'ADP-ribosylation de RhoA et des grande toxines clostridiales qui ciblent la même protéine humaine.
Publications
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