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Vendredi 01 Décembre 2006

Mariage prometteur des puces et de l'imagerie de Résonance Plasmonique de Surface

Les chercheurs du Laboratoire d'Immunochimie, en collaboration avec le DRFMC (DSM, CEA Grenoble) ont mis au point un système miniaturisé permettant un criblage à haut débit des interactions entre diverses molécules.






Développement d'une technique innovante pour la détection et le criblage à haut débit d'interactions biomoléculaires : application à la caractérisation d'anticorps anti-virus de l'Hépatite C



L'analyse des interactions entre biomolécules est un enjeu important, que ce soit en recherche fondamentale pour analyser les mécanismes biologiques ou en recherche appliquée dans des domaines tels que la médecine ou la pharmacologie. Ces études seraient facilitées par l'utilisation d'un système miniaturisé permettant un criblage à haut débit des interactions entre diverses molécules.


C'est dans ce but que les chercheurs de ce laboratoire, en collaboration avec le CREAB, ont mis au point un système de type puces à protéines/peptides couplées à une méthode optique de détection des interactions, l'imagerie de la Résonance Plasmonique de Surface (SPRi). L'immobilisation, spatialement contrôlée, d'un grand nombre de sondes (protéines ou peptides) sur la surface de la puce est réalisée par un procédé basé sur l'électropolymérisation du pyrrole. L'imagerie SPR permet la détection en temps réel et sans marquage, des interactions sondes-ligands, et donne accès aux paramètres réactionnels (Kon, Koff).


Cette technique a été validée par deux études :

• détection des anticorps anti-virus de l'Hépatite C dans des sérums de patients infectés et caractérisation de leur spécificité (utilisation de puces à peptides)


• mise en évidence d'une interaction entre les nucléocapsides des Morbillivirus et le récepteur cellulaire pour les parties Fc des immunoglobulines (Fc(lambda)RII = CD32 des cellules de l'hôte pouvant expliquer l'immunosuppression induite par ce type de virus (utilisation de puces à protéines).


Ce système associe la technologie des puces à protéines/peptides couplées à une méthode optique de détection des interactions, l'imagerie de la Résonance Plasmonique de Surface (SPRi). Les caractéristiques de cette méthode, i.e. analyse multiparamétrique et en temps réel, rapidité, compatibilité avec des milieux biologiques complexes tels que du sérum, en font un outil prometteur pour de nombreuses applications en recherche fondamentale et clinique.




RÉFÉRENCES

Cherif B, Roget A, Villiers CL, Calemczuk R, Leroy V, Marche PN, Livache T and Villiers MB
Clinically related protein-peptide interactions monitored in real time on novel peptide chips by surface plasmon resonance imaging.
Clinical Chemistry, 2006, 52(2) : 255-262

Kerdiles YM, Cherif B, Marie JC, Tremillon N, Blanquier B, Libeau G, Diallo A, Wild TF, Villiers MB and Horvat B
Immunomodulatory properties of morbillivirus nucleoproteins.
Viral Immunology, 2006, 19(2) :324-334

Cherif B, Villiers C, Paranhos-Baccalà G, Calemczuk R, Marche PN, Livache T and Villiers MB
Design and application of a microarray for fluorescence and surface plasmon resonance imaging analysis of peptide-antibody interactions.
Journal of Biomedical Nanotechnology, 2006, 2 : 29-35