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Équipe 07 Génome plastidial



Responsables
 
Silva Lerbs-Mache
DR1, CNRS
iRTSV/PCV
17 rue des Martyrs
38 054 Grenoble cedex 09
Tel. : 04 76 78 05 69
Fax : 04 38 78 50 91
  Thomas Pfannschmidt
Pr. UJF
iRTSV/PCV
17 rue des Martyrs
38 054 Grenoble cedex 09
Tel. : 04 76 78 05 69
Fax : 04 38 78 50 91
 
Membres de l'équipe
 
Fabien Chevalier, assistant ingénieur CNRS
Florence Courtois, MCF Université de Grenoble
Silva Lerbs-Mache, DR1 CNRS
Livia Merendino, CR1 CNRS
Thomas Pfannschmidt, Professeur Université de Grenoble
 
 
Activités de recherche
 
Notre activité principale est dédiée à l’étude de la biologie des chloroplastes. Ces organites, ayant pour origine une cyanobactérie ancestrale, sont le siège de la photosynthèse et de la biosynthèse de nombreux métabolites mais ils n’ont pas encore révélé tous leurs secrets. De nombreux gènes de la bactérie ancestrale ont été transférés vers le noyau au cours de l’évolution, aboutissant au system génétique de la cellule végétale actuelle qui résulte ainsi de trois génomes originaires (progénote, protéobactérie et cyanobactérie). Ces derniers après réorganisation ont permis l’émergence du système génétique intégré actuel, présent chez les plantes supérieures.

Notre intérêt porte sur l’expression du génome plastidial, i.e. la régulation de l’expression génique d’un organite dit « semi-autonome » dans le cadre d’un système intégré, avec un regard particulier sur la transcription des gènes.

Dans le chloroplaste, la transcription se fait dans le contexte d’un mini-génome, le génome plastidial. Chaque unité de ce génome est constituée d’un chromosome d’environ 150 kb, codant 130 gènes qui sont pour la plupart organisés en unités de transcription. Ceci réduit à environ 35 le nombre des régions promotrices de la transcription. Pourtant, trois ARN polymérases sont nécessaires à la transcription de chacun des chromosomes plastidiaux chez les plantes dicotylédones (une PEP = Plastid Encoded RNA Polymerase et deux NEP = Nucleus Encoded RNA Polymerases). À cette complexité s’ajoutent 6 facteurs participant à l’initiation de la transcription, chacun de type sigma70 (SIG1-SIG6). D’autres protéines partiellement caractérisées, s’associent aux complexes de transcription. Des analyses bio-informatiques suggèrent qu’entre 48 et 100 facteurs de transcription de type eucaryotique dont la fonction est entièrement inconnue, sont importés dans les plastes .

Comprendre la complexité de la transcription plastidiale et les interactions plastes-noyau dans la régulation de l’expression des gènes nous permettra de mieux comprendre le processus évolutif de l’intégration d’une cyanobactérie dans une cellule hôte et de sa transformation en un organite dont la fonction est essentielle pour la vie des végétaux verts et notamment des plantes supérieures.

Le facteur de transcription SIG2 a une fonction importante, en particulier pendant le développement de la jeune plantule.

Privat et al. 2003


Arabidopsis thaliana SIG2 antisense plant.
 
Résultats marquants
 
Les mécanismes de la transcription plastidiale :
 
• Mise en évidence d'une ARN polymérase de type phagique, monomérique, dans les plastes en utilisant des méthodes biochimiques.
Proceedings of the National Academy of Sciences USA, 1993, 90(12):5509-5513

• Caractérisation d'un facteur de transcription, CDF2, interférant dans la synthèse du rRNA plastidial au promoteur PC.
Genes and Development, 1994, 8(23):2928-3298

• Séparation de trois activités transcriptionnelles différentes dnas les plastes, l'une étant spécifique de la transcription de l'opéron ribosomique.
EMBO Journal, 2000, 19(8):1851-1860

• Élucidation de la fonction des facteurs de transcription SIG3 et SIG4.
Nucleic Acids Research, 2007, 35(2):455-464
Nucleic Acids Research, 2005, 33(18):5991-5999

• Identification de l'ARN polymérase spécifique de la transcription de l'opéron rrn au promoteur PC comme étant RpoTmp.
Plant Physiology, 2007, 145(3):712-721

• Établissement d'un système de transcription sélectif de l'expression contrôlée d'un trans-gène plastidial.
Plant Journal, 2006, 46(4):700-707
IBS News Report
Trends Biotech

• La régulation de l'activité de la RpoTmp est associée au trafficking intra-plastidial entre stroma et thylakoïdes.
Proceedings of the National Academy of Sciences USA, 2008, 105(26):9123-9128
 
D'autres activités :
 
• Analyse de la structure tridimensionnelle d’une graine d’Arabidopsis sans introduire d’altération par une coupure du tégument ou par d’autres traitements. Mise en évidence d’un espace intercellulaire en réseau, rempli d’air.
Proceedings of the National Academy of Sciences USA, 2006, 103(39): 14626-14630
Pour la science
ESRF Highlights

• Établissement d’un macroarray spécifique des plastes pour l’analyse du transcriptome plastidial incluant les ARN antisens.
Brevet FR/04.08.06/FRA 0607168
 
Projets en cours
 
• Photosynthèse embryogénique et maturation des graines : caractérisation de l’expression des gènes plastidiaux et de leur importance pour la vigueur germinative et la longévité des graines.

• La régulation de l’expression plastidiale par des ARN antisens.

• Le trafficking intraplastidial de l’ARN polymérase RPOTmp associée à des changements fonctionnels

• Tomographie à l’échelle nanométrique des graines d’Arabidopsis. La relation de la formation du réseau aérien avec la photosynthèse embryogénique.

• Valorisation du macroarray spécifique des plastes.