Étude de la voie de synthèse du Monogalactosyl diacylglycérol dans les tissus photosynthétiques. Régulation de MGD1 par l’acide phosphatidique
Le développement des chloroplastes dépend de la synthèse du galactoglycérolipide monogalactosyldiacylglycérol (MGDG). Le MGDG est formé dans les chloroplastes par l’enzyme MGD1 par transfert du galactose de l’UDP-galactose sur le diacylglycérol (DAG), dont une partie provient de l'hydrolyse des phospholipides extraplastidiaux par des phospholipases D (PLD) via l'acide phosphatidique (AP). Dans la voie de synthèse, cette étape semble importante puisque l'AP est le précurseur général des glycérolipides et un messager secondaire clé. Dans cette thèse, nous analysons le rôle de l'AP dans la synthèse du MGDG. Nous montrons que : 1) la teneur en AP de cultures cellulaires d’Arabidopsis affecte la quantité de MGDG formé par son action stimulatrice sur l'activité MGD, 2) l'AP active également le niveau de synthèse de MGDG dans des homogénats de feuilles et dans de l'enveloppe de chloroplastes isolée, et 3) l’AP active la protéine recombinante MGD1 de manière allostérique. Nous montrons que PLD?2 est localisée sur le tonoplaste et est potentiellement impliquée dans la régulation du niveau d’activité MGDG synthase. Par ailleurs, nous mettons en évidence que le phosphatidylglycérol (PG) est un deuxième activateur allostérique de MGD1. La comparaison du comportement de MGD1 en présence d’AP ou de PG indique que l’AP et le PG activent MGD1 par des mécanismes différents et se fixent sur MGD1 en des sites distincts. L’analyse de mutants ponctuels de MGD1 permet d’identifier des résidus impliqués dans l’activation de MGD1 par le PG. Suite à ce travail, nous proposons un modèle de régulation de la synthèse du MGDG dans les cellules foliaires.
.
Soutenue le 05 novembre 2009 pour obtenir le grade de Docteur de l'Université Joseph Fourier de Grenoble I - Discipline :
