Diagnostic
- Réseau d'excellence NeuroPrion
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Approches classiques
Le SEPIA a mis au point la méthode de purification de la protéine anormale du prion (PrPres) qui est à la base du test de diagnostic de l'ESB développé par le CEA et qui a été transférée à un partenaire industriel (BioRad). Ce test, basé sur cette méthode de purification couplée à une détection par technique ELISA, s'est révélé être le plus sensible des tests évalués par l'Union Européenne et représente aujourd'hui près de 80 % des test vendus dans le monde.
Cette méthode de purification est également utilisée dans le test de confirmation par western blot également commercialisé par la société BioRad sous licence CEA et qui vient d'être évalué comme aussi sensible que la méthode de dépistage par ELISA et dont la validation au niveau européen est en cours.
De plus, un test de diagnostic différentiel sur la base de ce western blot a été développé pour différencier chez le mouton, l'ESB de la tremblante, au moment du test de confirmation, cette différenciation n'étant pas réalisable en pratique avec les techniques diagnostiques classiques basées sur l'inoculation à l'animal. Ce test, qui vient d'être validé auprès de l'Europe, est désormais mis à disposition des laboratoires de référence comme test de sélection des échantillons susceptibles de correspondre à des souches anormales de prions.
Les autres axes diagnostiques concernent des programmes de détection de la PrPres dans les organes périphériques comme le muscle, des évaluations sur le lait et le sang ainsi que la recherche de prions dans l'environnement.
Recherche de nouveaux marqueurs
L'adaptation de la technique de RDA (Representational Difference Analysis) aux ARN totaux extraits de lignées cellulaires infectées ou non avait permis de prouver la validité de cette approche technologique et de déterminer toute une série de gènes dérégulés de manière significative chez des cellules infectées d'origine neuronale. Cette technique a été adaptée pour le sang et des signatures spécifiques ont été obtenues chez les animaux infectés dans les modèles murins développés au laboratoire.
La pertinence de ces résultats chez le primate est en cours d'évaluation pour déterminer le potentiel d'un test sanguin basé sur la combinaison de ces marqueurs indirects de la maladie. Il est à noter que d'autres approches indirectes, basées notamment sur la détection de combinaisons de pics non identifiés, ont d'ores et déjà été décrites comme capable d'identifier des prélèvements de sang de bovins infectés (technique basée sur la spectroscopie infra-rouge 1).
Antemortem identification of bovine spongiform encephalopathy from serum using infrared spectroscopy.
Lasch P, Schmitt J, Beekes M, Udelhoven T, Eiden M, Fabian H, Petrich W and Naumann D
Anal Chem., 2003 Dec 1;75(23): 6673-6678