Rôles des interactions interdomaines dans le comportement cellulaire de la protéine CFTR.
Interdomains interactions roles in CFTR protein.
CFTR est un canal chlorures appartenant à la superfamille des transporteurs ABC. Cette protéine est composée de 5 domaines : 2 domaines de liaison aux nucléotides (NBDs), 2 domaines transmembranaires (TMD) et un domaine de régulation. Les interactions entre ces différents domaines sont essentielles pour de nombreux processus, tels que le repliement, la maturation et la fonction de CFTR. Cependant, les rôles de ces domaines de manière individuelle et la nature de leurs interactions dans la biogenèse, le repliement, la maturation, la fonction et la stabilité membranaire de CFTR restent inconnus. Dans le but de préciser ceux-ci, nous avons étudié le comportement intracellulaire de protéines CFTR génétiquement modifiées. Nos résultats ont confirmé que contrairement à NBD2, NBD1 est essentiel pour la maturation et le trafic de CFTR vers la membrane plasmique. Le domaine NBD2 n’est pas important pour le repliement de la protéine, mais nous avons montré pour la première fois sa nécessité pour la stabilité de CFTR à la membrane plasmique. Dans une autre partie de ce travail, nous avons montré que le 6ème segment transmembranaire n’est pas stable dans la membrane plasmique et doit être important pour le repliement de la protéine, sans doute par son implication dans l’interaction entre les TMDs.
CFTR is a chloride channel which belongs to the ABC transporters superfamily. This protein is composed of 5 domains: 2 nucleotide binding domains (NBD), 2 transmembrane domains (TMD), and a regulatory one. Interactions between these different domains are essentials for numerous processes, including folding, maturation and function of CFTR. However, the roles of these domains and the nature of their interaction in biogenesis, folding, maturation, function and stability at the plasma membrane are still unknown. In order to precise these roles, we have studied the intracellular comportment of genetically modified CFTR proteins. Our results confirmed that contrary to NBD2, NBD1 is essential for the maturation and for the intracellular trafficking of CFTR. NBD2 is not important for the folding of the protein, but we point out for the first time its necessity for the stability of CFTR at the plasma membrane. In an other part of this work, we have shown that the 6th transmembrane segment is not stable in the plasma membrane et must be important for folding of the protein, probably by its implication in the packing of the TMDs.
Soutenue le 02 juillet 2008 pour obtenir le grade de Docteur de l'Université Joseph Fourier de Grenoble I - Discipline : Biologie cellulaire
